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关于筹建一个分子生物学实验室所需的仪器

一、 上游分子克隆

分子克隆手艺是分子生物学的焦点手艺，这项手艺的主要目的是获得某一基因或DNA片断的大宗拷贝，从而可以深入剖析基因结构与功效，并可抵达人为刷新细胞及物种个体的遗传性状的目的
。

1. 分子克隆的基本手艺蹊径：

1) 疏散制备目的基因或DNA片断；

2) 目的DNA与载体在体外举行毗连；

3) 重组DNA分子转入宿主细胞；

4) 筛选及判断阳性重组体；

5) 重组体的扩增
。

2. 分子克隆常用仪器：

二、 核酸分子杂交

核酸分子杂交手艺是分子生物学领域中最常用的手艺之一
。其基来源理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下可按碱基互补原则形成双链
。由于核酸分子杂交的高度特异性及检测要领的高度迅速性，使其在分子生物学领域中被普遍应用于分子克隆的筛选，基因组中特定基因序列的定量定性检测，基因表达和基因突变剖析及疾病的基因诊断等
。凭证核酸种类分为Southern印迹法和Northern印迹法
。核酸分子杂交中常用的仪器：

三、 下游卵白的表达及疏散纯化

目的基因能否施展其效应,只能通过其表达有功效的卵白质来实现,因此卵白质的表达及剖析要领成为分子生物学中必不可少的组成部分
。

1. 卵白的表达

大肠杆菌是自然界中最为人知的生物体之一
。由于其具有操作浅易，产量高和本钱低廉等优点，使其成为卵白质表达的首选宿主
。弱点是：表达缺乏翻译后加工，获得的卵白可能缺乏某些自然卵白所具有的活性
。酵母作为单细胞低等真核生物，具有易作育，滋生快，便于基因操作等优点，徐徐被开爆发为目的基因的表达系统
。其中甲基酵母作为外源基因的表达系统，可以真实地表达目的基因且能渗透产品到作育液中，有利于纯化等特点被普遍的应用
。动物细胞表达系统的优点是：表达产品经由准确修饰，一样平常具有自然活性，但操作重大，表达量较低，本钱较高
。所有的表达系统均各有利弊，需凭证实验或生产需要加以选择
。

2. 卵白质表达所需仪器

3. 目的卵白的疏散与纯化所需仪器

卵白质的疏散纯化是研究卵白质化学组成,结构及生物学功效等的基础
。遗传工程中，下游的处置惩罚和剖析判断，基因工程产品的制备都需要纯度较高的卵白质
。